发布日期: 2025-04-14 09:34:47 来源:贝博BB平台app免费下载
这款产品是在DeofectEU Transfection Reagent的基础上逐步优化研发成功的专门用于质粒DNA细胞转染的转染试剂。它有很卓越的转染性能,可高效转染多种贴壁细胞,转染效率在贴壁细胞中高达90%以上(EGFP质粒)。与目前市场上常见的脂质体转染试剂不同,它采用生物可降解材料配制,对细胞的毒性很低,转染后细胞死亡率不到10%。这款产品使用也十分便捷,先将转染试剂与质粒DNA混合,再将转染试剂-DNA复合物直接加入培养细胞中,血清不影响其转染效果,不必刻意添加或更换培养液,操作十分简便。
1、卓越的细胞转染性能:可高效转染多种贴壁细胞,转染效率在贴壁细胞中高达90%以上;
2、极低的细胞毒性:使用可降解生物材料,细胞毒性低,转染细胞死亡率不到10%,大幅度的降低了因细胞毒性对实验结果的影响,实验结果更为客观;
3、操作简便,可用于含血清培养基培养细胞的转染,转染前后不要换掉培养液。
3、最好在转染开始之前更换新鲜的含血清培养基,以防转染后孵育阶段细胞密度太大、营养不足导致细胞死亡。
1、在1.5ml无菌离心管中加入50ul Trans buffer,再加入适量的转染试剂,见附表。用移液器轻轻混匀后在室温静置5分钟。
2、在1.5ml无菌离心管中加入50ul Trans buffer,再加入适量的DNA,见附表。用移液器再次轻轻混匀后在室温静置5分钟。
3、将DNA-Trans buffer混合物滴加至R-Trans buffer混合物中,用移液器轻轻混匀后在室温静置15-20分钟后,立即转染。注意: R-Trans buffer混合物和DNA-Trans buffer混合物的混合顺序很重要,切勿颠倒。注意:离心管最好使用聚丙烯离心管。
1、将步骤B制备的转染复合物滴加至培养基中,边加边轻轻晃动培养板以使复合物均匀分布。加完后,立即将培养板转入培养箱继续培养。
3、R在完全培养基中仍有较高的转染效率,因此转染前后不需要换成无血清或低血清培养基。如果转染后要换掉新鲜培养基,请于加入R/DNA复合物12-24小时后进行。
-20℃避光保存,Trans buffer 可保存于2-8°C,有效期1年,使用前轻轻混匀。
转染前的细胞汇合度以90%左右为宜,转染时细胞生长状态应保持良好,不要有支原体污染。
首次转染,建议来优化实验,如24孔培养板,每孔质粒用量 0.8ug,转染试剂用量可选择2.0ul、2.5ul、3.0ul、3.5ul进行优化。
应避免转染复合物制备体系中存在血清,因血清会干扰R与 DNA形成复合物,培养基中最好还是不要使用抗生素。
本试剂盒大多数都用在质粒DNA转染,如需质粒DNA、RNA、siRNA均可转染的试剂,请选择核酸转染试剂盒(#abs60259)。